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产品说明/Specification Sheet
产品名称: | 柠檬酸缓冲液(干粉)(0.01M,pH6.0) | ||||
产品编号: | PM5100-10 | 规格: | 10*2L | 价格: | ¥80 |
产品类别: | 预混缓冲液干粉 | CAS#: | N/A | ||
品牌: | coolaber | 级别: | |||
分子式: | N/A | 分子量: | N/A | ||
危险品: | 危险品系数: | ||||
储存条件: | RT | 说明书: |
产品属性:
产品货号:PM5100•
包装规格:10袋/50袋(配制2L/袋)
储存条件:常温保存,保质期3年;配制好的工作液常温保存,保质期6个月。
产品简介:
本公司生产的柠檬酸缓冲液预混干粉,精选优质原料,经过特殊加工处理,呈均一白色粉末状,溶解
性好,使用起来方便快捷。可迅速配制成0.01M,pH6.0的柠檬酸缓冲液,作为抗原修复液。•
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键,蛋白之
间发生交联。封闭或隐蔽部分抗原决定簇,导致免疫染色信号减弱,甚至出现一些假阴性染色结果。免疫
组化染色时需要先进行抗原修复或暴露,即将固定后分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形
态。能够降低染色背景,提高抗原的检出率和检测的准确性。0.01M,pH6.0的柠檬酸钠缓冲液是一种常
用的抗原修复液,可以用于多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。能有效去除蛋白交联,充
分暴露样品中的抗原表位,从而改善免疫染色效果。石蜡切片都需进行抗原修复,可以提高免疫染色效果,
通常冰冻切片不进行抗原修复。但免疫染色效果不理想时,可以考虑抗原修复,能不同程度的提高的染色
效果。
按照每个片子需要10ml 抗原修复液计算,2L 抗原修复液可以用于200个样本的抗原修复。
使用说明:•
1.每袋粉剂可配制成2L,0.01M,pH6.0的柠檬酸缓冲液,作为抗原修复液。
2.配制时用去离子水或双蒸水作为溶剂。
3.打开包装袋,将包装袋中的粉剂全部溶于1800•ml 的去离子水或者蒸馏水中,定容至2L。
4. 柠檬酸修复液使用前需预热到95-100℃。可以使用水浴锅、微波炉加热。微波炉加热时,避免暴沸和
水分蒸发过多。
抗原修复过程:
1. 石蜡切片:A. 脱蜡:二甲苯3次,每次3-5min;无水乙醇2次,每次3-5min;95%乙醇1次,3-5min;
90%乙醇1次,3-5min;75%乙醇1次,3-5min;蒸馏水洗2次,每次3-5min。B. 抗原修复:将切片浸泡
在预热的柠檬酸修复液中,保持95-100℃加热约15 min (最佳的加热时间需根据样品和目的蛋白摸索) 。
冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5 min。随后进行封闭等免疫染色步骤。
2. 冰冻切片:用免疫染色洗涤液洗涤切片5 min。将切片浸泡在柠檬酸修复液中,95-100℃加热约15 min
(最佳的加热时间需根据样品和目的蛋白摸索)。冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5 min。
随后进行封闭等免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考以上步骤进行
注意事项:•
1.配制溶液前确保所需器材洁净。•
2.拆包装时,避免袋中粉末撒出,袋内残留少许干粉,略有结块不影响实验效果。
3.操作中请穿戴实验服和一次性手套,废弃包装袋及用品请弃于专用的垃圾袋内。
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