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产品说明/Specification Sheet
产品名称: | 蛋白酶抑制剂Cocktail(干粉) | ||||
产品编号: | PM6010 | 规格: | 1ml | 价格: | ¥220 |
产品类别: | 预混干粉试剂 | CAS#: | N/A | ||
品牌: | coolaber | 级别: | |||
分子式: | N/A | 分子量: | N/A | ||
危险品: | 危险品系数: | ||||
储存条件: | 24°C | 说明书: |
产品属性:
蛋白纯化,蛋白免疫印迹, 免疫(共)沉淀,蛋白质pull-down实验,免疫荧光,免疫组织化学,激酶测定等。 (加入1ml DMSO,即为100×Cocktail溶液)
问题1: 为什么要用蛋白酶抑制剂Cocktail?
回答1: 蛋白酶抑制剂Cocktail是低毒,全面的蛋白保护试剂,最大限度地保护蛋白,使其免于被蛋白酶降解。目前生物学研究日渐深入,更多地将目标锁定为细胞中较为微量的蛋白,如信号通路蛋白、受体蛋白,采用coIP,Pull-down等方法获得样品。对于这些微量的珍贵样品,Cocktail能取得最佳的保护效果,比单一的抑制剂(如PMSF)更为可靠。
问题2: 实验中经常用PMSF来保护蛋白,蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势?
回答2: PMSF是经典的丝氨酸蛋白酶抑制剂,以前被广泛应用于细胞裂解纯化蛋白过程。但由于PMSF在很多方面存在明显的缺点,逐步被保护效果更好,更安全的蛋白酶抑制剂Cocktail所取代。PMSF的毒性较高,因此在蛋白酶抑制剂中选用AEBSF作为其替代品。AEBSF的半致死量是2834mg/kg,而PMSF是200mg/kg,AEBSF安全域值超过PMSF十四倍多,同时有着相当的抑制效果,对于很多丝氨酸蛋白酶的抑制比PMSF更为迅速。PMSF的另一个缺点是易降解失效,它在水溶液中的半衰期是30min,在细胞裂解过程中很容易失效。而蛋白酶抑制剂Cocktail不但保护更加全面,而且效果更加持久。
问题3: DMSO会不会对我的实验造成影响?
回答3: DMSO会影响实验结果的可能性很低。在生物科学领域DMSO被作为很多生物活性物质的溶剂,比如蛋白结晶和免疫共沉淀等要求较高的实验体系中DMSO也有应用。DMSO在室温下性质稳定,在低温条件下DMSO还是优秀的细胞冷冻保护剂。
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